RFLP

Z Wikipedii

Obraz DNA w elektorforezie żelowej. Poszczególne pasma zawierają fragmenty kwasu nukleinowego o identycznej masie cząsteczkowej

RFLP (ang. Restriction Fragments Length Polymorphism – polimorfizm długości fragmentów restrykcyjnych).

RFLP jest techniką, w której organizmy mogą być różnicowane poprzez analizę wzorów pochodzących z podziału (rozłamu) ich DNA.

RFLP oznacza różnice pomiędzy rozmiarami fragmentów DNA (różnych osobników), pociętych specyficznymi enzymami restrykcyjnymi. Takie różnice długości fragmentów DNA powstają w wyniku mutacji, które tworzą lub eliminują miejsca rozpoznawane przez te enzymy. Sekwencje polimorficzne, które powstają w wyniku RFLP są używane jako znaczniki zarówno w mapach fizycznych jak i genetycznych.

Jest to metoda, która pozwala na wykazanie powiązań rodzinnych poprzez porównywanie charakterystycznych wzorów polimorficznych, które są otrzymywane, gdy określone regiony łańcucha DNA są powielane (szczególnie przy użyciu techniki PCR) i pocięte przez określone enzymy restrykcyjne.

RFLP jest kluczowym narzędziem w rozpoznawaniu DNA, określaniu obecności różnych alleli u osobników. Mapowanie polimorficznych długości fragmentów restrykcyjnych jest także używane w hodowli roślin po to, by wykazać czy cecha taka jak np. odporność na choroby, została odziedziczona. Podobnie jeżeli polimorfizm zostaje wykryty w pobliżu miejsca gdzie występuje defekt genetyczny, RFLP jest wartościowym znacznikiem pokazującym drogę dziedziczenia tego defektu. W szczególności dana osoba może być zidentyfikowana dzięki tej metodzie przy badaniu pozostałości krwi, włosów i nasienia i w związku z tym RFLP jest szeroko używana w kryminalistyce. Za wyjątkiem bliźniąt jednojajowych ^{[1] [2] [3]} metoda ta pozwala na niemalże pewne odróżnianie poszczególnych osób. Jednak nawet w przypadku identycznych bliźniąt pojawiły się doniesienia o możliwości stosowania tej analizy DNA do ich rozróżnienia ^[4].

Pierwszym przestępcą skazanym na podstawie takiego materiału dowodowego był w 1987 brytyjski piekarz Colin Pitchfork, skazany za dwa morderstwa połączone z gwałtem; w 1989 doszło do pierwszego uniewinnienia w oparciu o badanie RFLP – pierwotnie skazany na podstawie relacji świadków na 50 lat więzienia za gwałt i porwanie, Amerykanin Gary Dotson został uniewinninony po przeprowadzeniu badań DNA w kilka lat po rozpoczęciu odbywania wyroku. Gdy stosowanie tej techniki dochodzeniowej zostało nagłośnione, pojawiły się też pierwsze przypadki oszustw: w 1992 kanadyjski doktor John Schneeberger, oskarżony o gwałt na pacjentce, wszczepił we własne ramię zasobnik z obcą krwią i antykoagulantami by uniknąć pobrania obciążającej go próbki na potrzeby badań. Porównanie fragmentów restrykcyjnych matki, dziecka i domniemanego ojca pozwala także na potwierdzenie lub wykluczenie ojcostwa. Zobacz też: przegląd zagadnień z zakresu biologii

[edytuj] Przypisy

1. ↑ Mono- and dizygotic twins in forensic paternity testing in practice at the Department of Forensic Medicine (Silesian Academy of Medicine, Katowice) in the years 1996-2003 Raczek.E.
2. ↑ The analysis of human DNA fingerprints by the synthetic oligonucleotide probe Lan L, Zhang X, Huo Z, Duan B.
3. ↑ Individual-specific DNA fingerprinting in man using the oligonucleotide probe (GTG)5/(CAC)5. Peters C, Schneider V, Epplen JT, Poche H.
4. ↑ The use of genomic "dactyloscopy" for the diagnosis of monozygotic twins Ivanov PL, Verbovaia LV, Gurtovaia SV.