اندونوکلئاز
از ویکی‌پدیا، دانشنامهٔ آزاد.
آنزیمهای اندوکلئاز به دو دسته اختصاصی و غیر اختصاصی تقسیم می‌‌شوند. دسته اول توالی ویژه‌ای را شناسایی کرده و برش می‌‌دهند که اصطلاحا اندونوکلئازهای محدودکننده نامیده می‌‌شوند. این نوع آنزیمها از اهمیت ویژه‌ای در کلونینگ DNA بر خوردار می‌‌باشند. دسته دوم از این آنزیمها به طور تصادفی اسیدهای نوکلئیک را برش می‌‌دهند. در زیر به معرفی تعدادی از آنزیمهای اندونوکلئاز غیر اختصاصی پرداخته می‌‌شود.
فهرست مندرجات |
[ویرایش] DNaseI
این آنزیم فقط قطعات دو رشته‌ای DNA را برش می‌‌دهند. از آن در حذف DNA در هنگام خالص سازی RNA، فوت پرینتینگ، شناسایی نواحی فعال کروماتین از نظر نسخه برداری استفاده می‌‌شود.
[ویرایش] نوکلئاز S۱
این آنزیم از آسپرژیلوس اریزا بدست می‌‌آید و در آنالیز هیبریدهای RNA/DNA برای شناسایی اینترون ها، ایجاد مولکولهای دو رشته‌ای DNA با انتهای صاف و باز کردن ساختارهای سنجاق سر مانند که در هنگام سنتر cDNA ایجاد می‌‌شوند بکار می‌‌رود. در برخی موارد از آنزیم نوکلئازمونگ بین بجای نوکلئاز S۱ برای این عمل استفاده می‌‌شود. آنزیم فوق از نوکلئاز S۱ اختصاصی تر عمل می‌‌نماید.
[ویرایش] نیکاز
این دسته از آنزیمها فقط یکی از زشته‌ها را بر روی مولکولهای دو رشته‌ای DNA برش می‌‌دهند. مانند آنزیمهای HincII و gpA. آنزیمgpA به‌وسیله فاژ فیX۱۷۴ تولید می‌‌شود و در نشاندار کردن DNA به کار برده می‌‌شود.
[ویرایش] نوکلئاز P۱
این آنزیم از باکتری پنسیلیوم کریزوژنوم بدست می‌‌آید و کلیه انواع اسیدهای نوکلئیک اعم از تک رشته‌ای و دو رشته‌ای را برش می‌‌دهد. از این آنزیم در آزمایشهای مختلف از جمله الکتروفورز با تغییر حرکت (EMSA) کاربرد دارد.
[ویرایش] RNaseA
این آنزیم از پانکراس گاو بدست می‌‌آید و دارای فعالیت اندونوکلئازی بر روی مولکولهای تک رشته‌ای و دو رشته‌ای RNA است. برای حذف RNA در هنگام تلخیص DNA و همچنین شناسایی جهشهای نقطه‌ای در مولکول mRNA استفاده می‌‌شود.
[ویرایش] RNaseH
این آنزیم رشته‌های RNAای که بصورت هیبرید با DNA (RNA/DNA) می‌‌باشند را تجزیه می‌‌کند. کاربرد آن در تولید cDNA، شناسایی هیبریدهای RNA/DNA می‌‌باشد.
[ویرایش] RNase ONE
این آنزیم فقط مولکولهای RNA تک رشته‌ای را برش می‌‌دهد و در تعیین توالی RNA، آزمون محافظت در برابر ریبوکلئاز، شناسایی نواحی غیر مکمل در هیبریدهای DNA/RNA کاربرد دارد.
[ویرایش] منابع
Brown TA (2001)Gene Cloning and DNA Analysis: An Introduction. Blackwell Scientific Publication , Oxford .
Primrose SB, Twyman RM ,Old RW (2001) Principles of Gne Manipulation ,6th edn. Blackwell Scientific Publication , Oxford .
