Transfert d'énergie entre molécules fluorescentes
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Le transfert d'énergie entre molécules fluorescentes ou transfert d'énergie par resonance de type Förster (FRET, pour l'acronyme anglais "Fluorescent resonance energy transfer" ou plus rigoureusement "Förster resonance energy transfer") est un phénomène quantique se produisant entre deux molécules fluorescentes proches l'une de l'autre (distance comprise entre dix et cent Angstrom) et dont le spectre d'émission de l'une (la molécule "donneuse") recouvre partiellement le spectre d'excitation de l'autre (la molécule "acceptrice). Lorsque la donneuse D est excitée par un photon, elle peut transmettre son énergie à l'acceptrice A qui alors se retrouve à un état excitée et émet de la lumière. Concrètement, en excitant D à sa longueur d'onde d'excitation, on n'observe pas l'intensité de fluorescente attendue, mais une émission lumineuse à la longueur d'onde d'émission de A. On peut évaluer alors la distance entre les deux molécules en fonction de l'efficacité du transfert d'énergie entre les deux molécules. (Il faut cependant noter que le phénomène de transfert d'energie ne s'accompagne pas forcement d'une emission de fluorescence de l'accepteur)
Sommaire |
[modifier] Description physique du FRET
La fluorescence est l'émission d'un photon par la relaxation d'une molécule préalablement excitée. Le spectre
[modifier] Différentes méthodes d'observation du FRET
[modifier] Méthodes utilisant des mesures d'intensité lumineuse
[modifier] Comparaison des intensités d'émission du donneur et de l'accepteur
[modifier] Comparaison de l'intensité d'émission du donneur avant et après blanchiment de l'accepteur
[modifier] Méthodes utlisants des mesures de durée de vie de fluorescence
[modifier] Exemples d'application du FRET
[modifier] Mesures de la distance entre deux molécules
[modifier] Mesures d'une interaction biologique entre deux protéines
[modifier] Mesures d'un changement conformationnel d'une protéine
[modifier] Indicateur biologique
[modifier] "CaMéléon"
[modifier] Senseur de l'AMPc
[modifier] Voir aussi
[modifier] Bibliographie
- Lakowitz J.R.; Principles of fluorescence spectroscopy, second edition; Kluwer Academic/Plenum publisher.
