Autofagia
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Autofagia es uno de los mecanismos celulares para degradacion de proteinas y es el unico medio conocido para degradar organelos. La autofagia es generalmente inducida bajo condiciones de estres celular, tales como falta de nutrientes, incremento de temperatura o estres oxidativo.
Los genes que participan en la autofagia son denominados Atg(1-16) en Saccharomyces cerevisiae y la mayoria de ellos cuenta con sus respectivos genes ortologos en celulas de plantas, mamiferos y protistas. La autofagia se encuentra conservada en todas las celulas eucariontes. Autofagia se ha relacionado con proliferacion, diferenciacion, respuesta inmune contra patogenos, cancer, apoptosis y recientemente se ha propuesto como una herramienta que permite a la celula obtener energia, acidos grasos y aminoacidos permitiendo su supervivencia en condiciones adversas.
La autofagia se caracteriza por la formacion de vesiculas de doble membrana llamadas autofagosomas, las cuales capturan el material citoplasmatico (proteinas u organelos) y lo transportan hasta los compartimentos acidicos (vacuolas en el caso de levaduras o lisosomas en el caso de celulas de mamifero), donde son degradados por enzimas hidroliticas.
Los autofagosomas en levaduras tienen un diametro de 300 a 900 nm, mientras que en celulas de mamifero son mayores (1000 a 1500 nm). La biogenesis de estas vesiculas es regulada por dos sistemas denominados UBL (ubiquitin like systems). El primer sistema conjuga Atg5 con Atg12, formando el complejo Atg5-Atg12. El segundo conjuga a Atg8 con fosfatidiletanolamina, esta modificacion permite que una proteina citosolica como Atg8 se una a la membrana de los autofagosomas hasta que estos son degradados, haciendo de Atg8 el marcador autofagosomal por excelencia. La fosfolipidacion de Atg8 es regularmente monitoreada por Western-blot utilizando geles de poliacrilamida suplementados con 6M de urea, en los cuales se puede diferenciar perfectamente la proteina de membrana de la citosolica.
