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En biochimie, un cofacteur est une substance dont la présence est nécessaire en plus d'une enzyme pour catalyser une certaine réaction. (Toutefois, des substances plus ou moins ubiquitaires comme l'eau ne sont pas prises en compte.)
Certains cofacteurs sont minéraux, tels des atomes métalliques de zinc, fer, et cuivre dans certaines formes. D'autres, telles la plupart des vitamines, sont organiques et peuvent, pour les coenzymes mobiles, se détacher de l'apoenzyme.
