Urée-tryptophane
Un article de Wikipédia, l'encyclopédie libre.
Le milieu Urée-tryptophane, improprement appelé urée-indole est un milieu de culture synthétique utilisé en bactériologie permettant la mise en évidence simultanée :
- De la production d'indole (par l'hydrolyse du tryptophane par la tryptophanase) ;
- De l'hydrolyse de l'urée (par une uréase) ;
- La désamination du tryptophane par la tryptophane désaminase.
Sommaire |
[modifier] Composition
- L-tryptophane ............................... 3 g - Urée ........................................ 20 g - Monophydrogénophosphate de potassium ........ 1 g - Dihydrogénophosphate de potassium ........... 1 g - Chlorure de sodium .......................... 5 g - Éthanol à 95 °GL ............................ 10 ml - Rouge de phénol ............................. 25 mg - Eau distillée (qsp) ......................... 1 l
[modifier] Préparation
à stériliser par filtration (utiliser de l'eau stérile pour limiter la contamination initiale).
[modifier] Lecture
- A uréase -
- B uréase +
- C indole +
- D indole -
- E TDA +
- milieu rouge (basique) : uréase +
- milieu orange ou jaune : uréase -
- après addition de réactif de Kovacs : anneau rouge (indole +), anneau jaune (indole -)
- après addition de chlorure de fer III : marron (TDA +), jaune (TDA -)
[modifier] Production d'indole
La réaction d'hydrolyse du tryptophane, catalysée par la tryptophanase, produit de l'indole, de l'acide pyruvique et de l'ammoniac selon l'équation suivante :
L'indole produit est mis en évidence par le réactif de Kovacs. Le diméthylamino-4-benzaldéhyde réagit avec l'indole avec formation d'un composé rouge.
[modifier] Hydrolyse de l'urée
Elle est catalysée par l'uréase, il y a production de dioxyde de carbone et d'ammoniac. Ce dernier alcalinise le milieu. Cette alcalinisation du milieu est mise en évidence par le virage du rouge de phénol au rose.
[modifier] Désaminsation du tryptophane
Consulter l'article à propos de la tryptophane désaminase.
L'acide indole-pyruvique est mis en évidence par sa complexation en un composé marron foncé en présence d'ions fer III (ferriques, Fe3 + ).
