Kalceina
Z Wikipedii
Kalceina, znana także jako fluorekson, fluorexon, komplekson fluoresceiny, oftasceina (aczkolwiek chemicznie nie jest ona pochodną fluoresceiny) - to barwnik fluorescencyjny o szerokim spektrum zastosowań. W postaci czystej występuje jako pomarańczowe kryształki.
Kalceina jest wzbudzana światłem ultrafioletowym. Ma maksimum absorpcji przypadające na długość fali świetlnej równą 495 nm, a maksimum emisji przy 515 nm (kolor zielony). Ma właściwości samo-wygaszające przy stężeniach powyżej 100 mM.
W obecności jonów wapnia, kompleksuje z nimi co zmienia jej charakterystykę spektralną, wobec czego bywa stosowana do fluorymetrycznego oznaczania jonów tego pierwiastka w roztworach, ale także w układach żywych (na przykład komórkach) [1].
Acetometoksy pochodna kalceiny (kalceina AM) ma zdolność swobodnego przenikania przez błony biologiczne. Ta pochodna jest używana do tymczasowego wybarwiania komorek żywych. Grupa modyfikująca AM zasłania miejsca wiązania wapnia, ale ponieważ motyw ten jest podatny na enzymatyczną degradację, po wniknięciu kalceiny AM do komórki, następuje odcięcie grupy AM, co uniemożliwia jej powrót oraz ponownie umożliwia wiązania wapnia. Rezultatem jest silna, zielona fluorescencja po wzbudzeniu. Mechanizm ten działa tylko w komórkach żywych - w martwych brak odpowiednich enzymów, wobec czego technika ta ma zastosowanie do określania żywotności komórek. W połączeniu z samowygaszaniem kalceiny, może być używana także do śledzenia zmian objętości komórek [2].
Kalceina bywa także (z powodu wiązania wapnia) używana do wybarwiania kości [3], a nawet całych szkieletów organizmów [4].
[edytuj] Identyfikacja
- wzór sumaryczny: C30H26N2O13
- numer CAS: 1461-15-0
- masa cząsteczkowa: 622,55 g/mol
[edytuj] Przypisy
- ↑ LANGENDORF H. [Direct complexometric calcium determination in serum with calcein as indicator.] Klin Wochenschr. 1958 Sep 1;36(17):829-31.
- ↑ Solenov E, Watanabe H, Manley GT, Verkman AS. Sevenfold-reduced osmotic water permeability in primary astrocyte cultures from AQP-4-deficient mice, measured by a fluorescence quenching method. Am J Physiol Cell Physiol. 2004 Feb;286(2):C426-32. Epub 2003 Oct 22.
- ↑ Rahn BA, Perren SM. Calcein blue as a fluorescent label in bone. Experientia. 1970 May 15;26(5):519-20.
- ↑ Klesius PH, Evans JJ, Shoemaker CA, Pasnik DJ. A vaccination and challenge model using calcein marked fish. Fish Shellfish Immunol. 2006 Jan;20(1):20-8.
