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Cette section de la Chronologie de l'histoire du Québec et de la Nouvelle-France concerne les événements ayant eu lieu entre le premier voyage de Jacques Cartier et la fondation de l'Habitation de Québec par Samuel de Champlain.
- 1560 - Les Portugais détruisent la France Antarctique suite à de nombreux conflits entre protestants et catholiques.
- 1562 - La France tente de coloniser ce qui est aujourd'hui la Caroline du Sud et la Floride. Les expéditions conduites par Jean Ribault et Goulaine de Laudonnière, au nombre de trois, se solderont par des échecs.
- 1565 - Les colons Espagnols, dirigés par Pedro Menéndez de Avilés, massacrent les Français huguenots qui tentent de coloniser la Floride.
- 1568 - Dominique de Gourgues dirige une expédition de représailles contre les Espagnols.
- 1581 - De 1581 à 1584, plusieurs marchands français organisent des expéditions en Nouvelle-France, en Amérique du Nord dans l'espoir de trouver des fourrures rares et d'autres richesses.
- 1600 - Pierre de Chauvin établit un poste de traite (tabagie) à Tadoussac, Québec.
- 1603 - Samuel de Champlain, et François Gravé, sieur du Pont, explorent le Saint-Laurent jusqu'au Sault Saint-Louis.
- 1603 - Les Français, les Montagnais et les algonquins s'unissent dans une alliance diplomatique et commerciale.
- 1604 - Pierre Dugua de Mons, Jean de Biencourt et Samuel de Champlain hivernent à l'Île Sainte-Croix.
- 1605 - Pierre Dugua de Mons, toujours accompagné du navigateur Samuel de Champlain, fonde Port Royal, aujourd'hui Annapolis en Nouvelle-Écosse.
- 1606 - À Port-Royal, Marc Lescarbot organise la première production théâtrale européenne en Amérique du Nord. La production s'appelait Le Théâtre de Neptune. Il s'agissait d'une sorte de ballet sur l'eau.
- 1607 - Le 14 mai, le capitaine Christopher Newport fonde la première colonie anglaise de l'Amérique : Jamestown, Virginia.